【樣本要求】
血液樣品應(yīng)當(dāng)依循一般血液取樣指南。應(yīng)該使用新鮮的,未溶血的樣品。如果需要由離心的紅細(xì)胞樣品
制備紅細(xì)胞懸液,應(yīng)使用生理鹽水重懸。我們建議在制備細(xì)胞懸液之前洗滌細(xì)胞至少2次或直至上清液澄清。嚴(yán)重的白血病,黃疸,或者微生物污染樣品可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。
【操作步驟(間接抗人球蛋白試驗(yàn))】
試管法
1. 用生理鹽水配制3~5%的待測紅細(xì)胞懸液。
2. 取標(biāo)記清晰的潔凈試管,加入50μl(1滴)試劑和50μl(1滴)紅細(xì)胞懸液。
3. 37℃孵育30~60分鐘。
4. 生理鹽水洗滌紅細(xì)胞三次,末次洗滌后瀝干鹽水。
5. 向試管中加入100μl(2滴)抗人球蛋白試劑,并充分混勻。
6. 3000rpm離心20秒。
7. 輕搖試管,輕輕重懸紅細(xì)胞,肉眼觀察試管底部是否出現(xiàn)凝集。
8. 記錄結(jié)果。
應(yīng)同時(shí)進(jìn)行平行的陽性和陰性對照。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 陽性結(jié)果:紅細(xì)胞凝集。
2. 陰性結(jié)果:紅細(xì)胞不凝集。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)及檢驗(yàn)方法的局限性】
為防止在間接抗人球蛋白試驗(yàn)中出現(xiàn)陰性結(jié)果,需要用抗體致敏的試劑細(xì)胞進(jìn)行一組平行試驗(yàn)。陰性的結(jié)果可能由于錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)操作或者試劑失效而引起。
【注意事項(xiàng)】
1. 該試劑為澄清液體,渾濁或其它可視化的改變都可能是由細(xì)菌污染引起的。在這種情況下,試劑不應(yīng)該使用。引起污染的原因需由制造廠商檢測。
2. 所有操作技術(shù)都應(yīng)遵循制造商提供的操作指南,任何不按照操作進(jìn)行而導(dǎo)致的引發(fā)的責(zé)任由使用者自己承擔(dān)。使用后的試劑按醫(yī)療生物垃圾廢棄物處理。
3. 所有血液產(chǎn)品均應(yīng)視為潛在感染源。該試劑所用的獻(xiàn)血者或者細(xì)胞株下列檢測都為陰性:HIV,HCV,HBsAg,EBV及MAP病毒。但是,目前尚無檢測方法能夠保證人血源產(chǎn)品沒有任何感染源。因此建議用戶在使用該產(chǎn)品時(shí)注意防護(hù)。
4. 該試劑所用的牛血清白蛋白沒有傳播性海綿狀腦?。═SEs)。
5. 該試劑僅供研究、不用于臨床診斷。
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